如今蛋白組/代謝組學(xué)被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)（液質(zhì)聯(lián)用）是蛋白組/代謝組學(xué)研究的主要手段，因此液質(zhì)聯(lián)用受到了醫(yī)學(xué)科學(xué)們非常大的重視。

液質(zhì)聯(lián)用儀是將液相色譜儀與質(zhì)譜儀聯(lián)用的儀器，用于樣品定性定量分析。其特點是將應(yīng)用范圍非常廣的液相色譜分離方法與靈敏、專屬、能提供分子量和結(jié)構(gòu)信息的質(zhì)譜法結(jié)合起來的一種現(xiàn)代分析技術(shù)。

二手液質(zhì)聯(lián)用儀技術(shù)原理：

樣品通過液相色譜分離后的各個組分依次進入質(zhì)譜檢測器，各組分在離子源被離子化，產(chǎn)生帶有一定電荷、質(zhì)量數(shù)不同的離子。不同離子在電磁場中的運動行為不同，采用質(zhì)量分析器按不同質(zhì)荷比（m/z）把離子分開，得到依質(zhì)荷比順序排列的質(zhì)譜圖。通過對質(zhì)譜圖的分析處理，可以得到樣品的定性和定量結(jié)果。

液相色譜分析的一般流程圖解

液相色譜部分由進樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)三個部分組成

（1）進樣裝置要求密封性好，死體積小，重復(fù)性好，中心進樣，進樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。

（2）輸液系統(tǒng)主要的是梯度洗脫裝置——有兩種方式：一種稱低壓梯度，指常壓下溶劑按一定比例混合后再由高壓泵輸入色譜柱，又稱外梯度；另一種稱高壓梯度，指先用高壓泵將各溶劑輸入混合器混合，再送入色譜柱，也稱為內(nèi)梯度。

（3）分離系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。與單純LC相比，LC-MS一般流速較低（高流速可能影響霧化效果），所以一般用窄徑柱，即2 mm或2.1mm的，粒徑一般為3.5μm，也有1.7μm的。

質(zhì)譜的電離與質(zhì)量分析流程圖解

（1）ESI電離：其工作原理是將液滴變成蒸汽，產(chǎn)生離子發(fā)射的過程中形成的溶劑由液相泵輸送到ESI Probe，經(jīng)其內(nèi)的不銹鋼毛細(xì)管流出，這時給毛細(xì)管加2－4 kv的高壓，由于高壓和霧化氣的作用，流動相從毛細(xì)管頂端流出時，會形成扇狀噴霧，使液滴生成含樣品和溶劑離子的氣溶膠。ESI屬于zui軟的電離方式，通常只產(chǎn)生分子離子峰。適合熱不穩(wěn)定的極性分子，能分析小分子及大分子。

（2）四極桿質(zhì)量分析器：四極桿內(nèi)所包圍的空間存在雙曲線形電場。從離子源入射的加速離子穿過四極桿中的電場會受到電場作用，只有選定的m/z離子以限定的頻率穩(wěn)定的通過四極桿質(zhì)量分析器，其他離子則碰到極桿上被吸濾掉，不能通過，即達到“濾質(zhì)"的作用。四極桿質(zhì)量分析器結(jié)構(gòu)緊湊，體積小，掃描速度快，適用于LC-MS聯(lián)用儀。

二手液質(zhì)聯(lián)用儀檢測流程總結(jié)

所謂液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜實驗，就是通過液相色譜把要分析的混合物分離開，再用質(zhì)譜對某個或某些分子進行定性或定量。它的強大功能使之不僅能輕松面對單個分子的研究，更加適合針對于復(fù)雜樣本的“組學(xué)"分析。由于蛋白質(zhì)和小分子性質(zhì)的差異，面向蛋白組學(xué)和代謝組學(xué)的液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)也有所區(qū)別，我們將在后續(xù)的篇幅中介紹液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)在各類學(xué)研究中的應(yīng)用，敬請期待。